現(xiàn)在科學(xué)技術(shù)和新興產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，ELISA試劑盒對(duì)化學(xué)試劑的純度\純度\精密度的需求越來(lái)越嚴(yán)格和專業(yè)化。ELISA試劑盒的挑選很重要，中海生物認(rèn)為大致有四個(gè)方面:

?檢測(cè)方法

盡管，ELISA試劑盒的檢測(cè)方式方法有很多，我們可以按照自身的偏好來(lái)選購(gòu)。通常ELISA檢測(cè)酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物，抗體與相對(duì)應(yīng)的酶結(jié)合，反應(yīng)體系中添加相對(duì)應(yīng)的底物。這樣的酶促反應(yīng)造成特征顏色，可以用分光光度計(jì)檢測(cè)。堿性磷酸酶ap也是一類常見(jiàn)的酶。該酶可以與第一抗體或第二抗體結(jié)合，同時(shí)鏈霉親和素標(biāo)記的酶也能夠與親和素標(biāo)記的第一抗體結(jié)合。另外ELISA結(jié)果還包含放射性檢測(cè)/熒光檢測(cè)/化學(xué)發(fā)光或顯色檢測(cè)等。

?實(shí)驗(yàn)操作形式

盡管類型諸多，但會(huì)出現(xiàn)一項(xiàng)相同的特點(diǎn)，便是抗原捕獲。捕獲的通常形式包含將抗原吸附到微孔板或在微孔板上用抗體捕獲。酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)和in-cell Elisa是兩種特殊類型。in-cellElisa需要將微孔板培養(yǎng)的細(xì)胞固定化/通透化，隨后用抗體原位檢測(cè)。酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)有點(diǎn)像蛋白印跡，先將細(xì)胞培養(yǎng)在膜微孔板中，隨后在膜上檢測(cè)細(xì)胞分泌的抗原，形成斑點(diǎn)。另外中海建議需要按照自身的需要選購(gòu)九十六孔板或四十八孔板進(jìn)行Elisa實(shí)驗(yàn)操作。

?抗體形式

單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用作Elisa，但有時(shí)候兩者的組合更好。例如雙抗體夾心法，用多抗體捕捉，用單抗體檢測(cè)，有時(shí)候更有幫助。多抗體可以確保捕獲全部抗原，隨后單克隆抗體可以特異性檢測(cè)具有特定表位的抗原。

?交叉反應(yīng)

假如抗體之間有沖突或交叉反應(yīng)，會(huì)影響所有實(shí)驗(yàn)操作的特異性。抗體來(lái)源的相容性是交叉反應(yīng)的一項(xiàng)原因。盡管從支釘動(dòng)物身上購(gòu)買(mǎi)抗體越來(lái)越容易，但仍然需要確認(rèn)是不是會(huì)出現(xiàn)交叉反應(yīng)。用雙抗體夾心法進(jìn)行Elisa時(shí)，檢測(cè)用的第二抗體務(wù)必對(duì)第一抗體有特異性，但無(wú)法與捕獲抗體反應(yīng)。假如檢測(cè)二抗和捕獲抗體結(jié)合，實(shí)驗(yàn)操作的特異性會(huì)大幅度降低。中海通常選購(gòu)不同宿主的捕獲抗體和檢測(cè)一抗來(lái)規(guī)避以上問(wèn)題。

本文鏈接：http://www.qyzxpj.com/news/wenku-sjhtxzy.html