LuriaBertani固體液體培養基組成成分與配制
日期:2021-07-16 | 中海生物技術文庫 | 瀏覽:1136 次
LB培養基(LuriaBertani)是具有典型性的進行各種細菌培養使用,是分子生物學的常規試劑。LB固體培養基粉劑主要是由胰蛋白胨/酵母提取物/氰化鈉瓊脂粉組成,充分溶解于無菌水中,加熱制成固體平板(如果嚴格要求無菌,則應進行高壓滅菌)。
中海LB培養基組成成分:
壹升LB固體培養基是和液體一樣,加入15克瓊脂粉,根據實際操作經驗將培養基中加入氫氧化鈉調節pH在7.0~7.4之間。此pH值適合應用最廣泛的原核表達菌株大腸桿菌的生長。
LB固體培養基
一定要在溫度下降前加入抗生素,然后將LB固體培養基倒入平板。
㈠LB培養基制備:100毫升LB培養基加入1.5克瓊脂粉
㈡添加抗生素:高壓蒸汽滅菌再將已融化的LB固體培養基放入55℃熱水中。當培養基溫度降到55℃時,可以觸摸添加抗生素并搖勻,以免因溫度過高導致抗生素失效。抗生素終濃度為氨芐青霉素 100微克/毫升,卡那霉素 50微克/毫升。
㈢倒入平板:將中 海培養基倒入培養皿后,打開蓋子,在紫外線下照射十至十五分鐘。通常十毫升倒壹板。
㈣LB培養基儲存:封邊用封口膠封口,倒置四度環境保存,三十天內使用。
LB液體培養基
中海生物準備每升培養基,要加入九百五十毫升DI水中,搖動容器直至溶質溶解。用5mol/L 氫氧化鈉 調節 pH 至 7.0~7.4。用去DI水定容至壹升。在15psi(kgf/cm²)高壓下蒸汽滅菌二十分鐘。中海LB肉湯培養基通常用于生化分子實驗中對菌株進行預培養,使菌株增殖達到要求用。培養的菌株一般都經過修飾,不能暴露于外界。僅在環境中生存和繁殖的工程細菌。通過中'海培養工程菌,我們可以制備更多的外源蛋白,同時能得到帶有外源基因的質粒。工程菌的有效擴增是生化分子實驗的基礎。
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